一、操作方法

1. 准备工作

1）工具准备

a)无菌棉绳（直径0.8-1.5cm，未化学处理）

b)无菌采样管（含保护液，如PBS缓冲液）

c)冰袋或冷藏箱（4℃保存）

d)一次性手套、防护服、口罩

e)记号笔（标记样本信息）

2）猪只选择

a)选择健康或检测的目标猪只（群体筛查可随机选5-10头）

b)采样前禁食2小时，避免饲料残渣干扰

2. 采集步骤

1)方法一：棉绳法（群体筛查常用）

a)将无菌棉绳一端打结，悬挂于猪栏内（高度与猪肩部齐平）

b)吸引猪只咀嚼棉绳，持续15-30分钟（棉绳需完全湿润）

c)戴手套取下棉绳，挤出液体至采样管（约3-5ml），冷藏保存

2)方法二：拭子法（个体检测）

a)保定猪只（使用限位栏或助手协助）。

b)用无菌棉拭子深入猪口腔，在舌根、颊部反复刮拭10-15秒。

c)将拭子浸入保护液，折断尾部密封保存。

3. 后续处理

1)样本4℃保存不超过24小时，长期需-80℃冷冻

2)记录猪只编号、采样时间、临床症状等信息

二、注意事项

1. 生物安全

1)操作者需佩戴手套、口罩，避免接触猪唾液

2)废弃棉绳/拭子需高温高压灭菌或者焚烧处理

2. 样本质量

1)避免棉绳被粪便污染

2)采集后立即冷藏，禁止反复冻融

3)若检测病毒（如非洲猪瘟），需添加病毒保存液

3. 动物福利

1)保定时间不超过3分钟，减少应激

2)仔猪优先使用棉绳法，避免强制保定

4. 特殊场景

1)发病期猪群：单独采集，避免交叉感染

2)运输前：低温保存，确保冷链不断

三、常见问题

1. 样本量不足：棉绳需充分咀嚼，可延长采集时间至1小时

2.检测结果异常：排除棉绳化学残留（建议预浸泡生理盐水）

3.仔猪不配合：涂抹少量蜂蜜或糖水诱导咀嚼